摘　要：本文通過(guò)發(fā)光菌發(fā)光強(qiáng)度與發(fā)光時(shí)間、發(fā)光菌發(fā)光強(qiáng)度與pH值的兩個(gè)影響關(guān)系實(shí)驗(yàn),確 定了發(fā)光菌穩(wěn)定發(fā)光時(shí)間和pH值范圍。通過(guò)8種單因子生物毒性實(shí)驗(yàn),確定了金屬離子、非金屬離子 對(duì)發(fā)光菌的半致死濃度。在此基礎(chǔ)上,評(píng)價(jià)了某油田不達(dá)標(biāo)采油污水的綜合毒性以及有機(jī)化合物對(duì)生 物的致毒機(jī)理。

主題詞：生物毒性　發(fā)光菌　發(fā)光強(qiáng)度　毒性等級(jí)

隨著生產(chǎn)和科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,人類(lèi)逐步認(rèn)識(shí) 到即使化學(xué)分析非常精確,也只能測(cè)出污染物中化合 物的成分、數(shù)量,而反映不出污染物對(duì)生物體危害的效 應(yīng)及程度。1992年,“北大西洋公約組織高科技討論 會(huì)”提出:“對(duì)于環(huán)境污染的監(jiān)測(cè),僅用化學(xué)方法是沒(méi)有 意義的,應(yīng)該將化學(xué)方法和生物方法兼而并用”。 生物毒性法是一種快速監(jiān)測(cè)分析方法。它能夠反 映各種有毒污染物對(duì)環(huán)境影響的綜合毒性,是一項(xiàng)綜 合性指標(biāo)。

1　材料和方法

1.1　菌　種

發(fā)光細(xì)菌凍干粉,冰箱2~5℃冷藏保存,臨用時(shí) 活化。

1.2　試　劑

NaCl、HgCl2、CdCl3、Pb(NO3)2、ZnCl2、KCN、Na2S、 K2Cr2O7、CuSO4·5H2O及FeCl3,均為分析純。

1.3　儀　器

DXY-2型生物毒性測(cè)定儀。

1.4　菌液活化

從冰箱室(2~5℃)取出發(fā)光細(xì)菌凍干粉安培瓶 和2% NaCl,打開(kāi)瓶頸,注入1 ml冷的2% NaCl,充分 混勻。將安培瓶放入有冰塊的1~1.5 L小保溫瓶。2 min后復(fù)蘇,備用。

1.5　測(cè)試方法

取6個(gè)測(cè)試管,3個(gè)平行加入2 ml樣品,其余3個(gè) 平行加入3%的NaCl溶液(空白樣),之后,在各個(gè)測(cè)試 管中加10μl復(fù)蘇發(fā)光菌液,蓋上瓶蓋,顛倒5次,以充 分混合均勻。拔取瓶塞,將測(cè)試管放入生物毒性測(cè)定 儀。當(dāng)發(fā)光細(xì)菌與樣品反應(yīng)達(dá)到穩(wěn)定時(shí)間時(shí),記錄各 測(cè)試管發(fā)光度(mV),由樣品發(fā)光度與空白發(fā)光度計(jì)算 樣品相對(duì)發(fā)光度。

2　結(jié)果與討論

2.1　條件實(shí)驗(yàn)

2.1.1　相對(duì)發(fā)光度與發(fā)光時(shí)間關(guān)系

以HgCl2為基準(zhǔn)毒性物質(zhì),選擇Hg2+濃度為0.06、 0.10、0.14 mg/l,分別測(cè)定發(fā)光細(xì)菌與樣品反應(yīng)5、10、 15、20、25 min的相對(duì)發(fā)光度。測(cè)定結(jié)果如圖1所示。 從圖1可以看出,利用生物毒性測(cè)試儀測(cè)定樣品 毒性時(shí),樣品相對(duì)發(fā)光度與發(fā)光時(shí)間存在一定的相互 關(guān)系。當(dāng)發(fā)光細(xì)菌與樣品接觸15 min后,相對(duì)發(fā)光強(qiáng) 度變化趨于平緩。15~20 min是最適宜的測(cè)定時(shí)間。

2.1.2　相對(duì)發(fā)光度與樣品酸堿度關(guān)系

將樣品的pH值分別調(diào)節(jié)到2.0、4.0、6.0、8.0、10. 0、12.0、14.0,測(cè)定不同pH值樣品的相對(duì)發(fā)光度。測(cè) 定結(jié)果如圖2。 圖2說(shuō)明,當(dāng)樣品pH值小于4或pH值大于8時(shí), 相對(duì)發(fā)光度小于100%。樣品的酸堿度愈強(qiáng),相對(duì)發(fā) 光度降低越顯著,樣品毒性愈大。由此可見(jiàn),pH值對(duì) 生物毒性的測(cè)定結(jié)果有影響。因此,實(shí)際測(cè)定樣品生 物毒性時(shí),如果考慮pH值的影響,則不需要調(diào)節(jié)pH 值,直接測(cè)定;否則,應(yīng)當(dāng)將pH值調(diào)節(jié)在4~8范圍內(nèi)。

………………

3　結(jié)　論

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