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CALUX二噁英檢測方案

人氣:1560 發(fā)布時間:2011-11-23 14:10

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CALUX是經(jīng)美國EPA批準的一種生物檢測方法(方法號SW 846-4435),可用于檢測土壤、水、煙氣、污泥、飼料、添加劑以及生物組織中的二惡英、呋喃和多氯聯(lián)苯,該方法已得到美國(FDA和EPA)、歐盟、智利、日本等國的廣泛采用,是大量篩查二惡英類污染物的新型快速檢測技術(shù)。

 

工作原理
  
CALUX是利用專利的基因技術(shù)改造細胞株(美國專利號5854010)進行檢測的一種生物檢測方法,該細胞株可因芳香烴受體被激活而通過熒光素酶表達。該細胞株和環(huán)境中的芳香烴二惡英類物質(zhì)接觸,使其增加合成CYP1A1蛋白質(zhì)的熒光素酶蛋白質(zhì),通過測定熒光素酶的發(fā)光量,即可求得樣品中的二惡英類物質(zhì)的TEQs濃度。
CALUX技術(shù)配套的樣品處理過程也獲得了美國專利(專利號6720431)。該過程可以有效分離PCBs和PCDDs/PCDFs,進而計算出分離后PCBs和PCDDs/PCDFs的TEQs值。
 
主要特點
已獲得美國、歐盟、日本等國官方認可,方法成熟可靠。
高靈敏度(1ppt)。
方法簡便易用,設(shè)備相對簡便。
前處理簡單,且易于操作。
與HRGC/MS結(jié)果相關(guān)性很好,可靠性高。
檢測周期短,3天即可出具檢測報告。
價格便宜,與高分辨GC/MS上萬元的檢測費用相比,可節(jié)省80%以上。
耗材成本低。
 
技術(shù)指標
1、當(dāng)環(huán)境中的芳香族二惡英類物質(zhì)侵入細胞內(nèi)之后,就和細胞中的受體結(jié)合。
2、芳香族二惡英類物質(zhì)與復(fù)合受體和可以運輸至核內(nèi)的蛋白質(zhì)ARNT結(jié)合。
3、芳香族二惡英類物質(zhì)/Ah受體/ARNT的三相復(fù)合體被輸送到細胞核內(nèi)。
4、三相復(fù)合體的CYP1A1基因或其他擁有XRE的基因結(jié)合,并指導(dǎo)合成CYP1A1酶和其他蛋白質(zhì)。
(酶的誘導(dǎo)•細胞分裂變化•細胞分化變化)→癌癥發(fā)生•畸形兒發(fā)生•免疫異常•發(fā)育異常)
5、4之中的XRE下游基因,被熒光素酶基因所轉(zhuǎn)換的部分,會指導(dǎo)合成光素酶。
6、各個基因所擁有的信息被轉(zhuǎn)譯成mRNA。
7、利用mRNA的信息,合成蛋白質(zhì)=翻譯。
8、在經(jīng)由4之下,CYP1A1酶和其他蛋白質(zhì)被合成。

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