水中腸道病毒檢測方法的分析評價
更新時間：2016-04-05 11:42
來源：環(huán)境工程學(xué)報
作者:
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摘要:
采用Hep-2細(xì)胞分離培養(yǎng)水中的腸道病毒,根據(jù)腸道病毒5'-UTR核酸的保守區(qū),建立了一種細(xì)胞培養(yǎng)與實時熒光定量PCR(ICC-RT-qPCR)聯(lián)合檢測感染性腸道病毒的方法。對RT-qPCR、TCID50和ICC-RT-qPCR3種檢測方法進(jìn)行靈敏度、相關(guān)性分析,評價RT-qPCR、ICC-RT-qPCR用于估計水中感染性病毒含量的可行性。結(jié)果表明,RT-qPCR方法高估了水中病毒的感染性。腸道病毒低濃度(4.4×10-1~4.4×103TCID50/mL)時TCID50與ICC-RT-qPCR線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)R2=0.99。水樣經(jīng)濃縮,ICC-RT-qPCR檢測病毒含量為1.0×103~3.2×104copies/L,估計含量為3~30TCID50/L,與病毒感染性11~29TCID50/L結(jié)果相近,檢出率為83.3%。高于TCID50的檢測結(jié)果(33.3%)。因此,ICC-RT-qPCR方法快速、靈敏,可對水中感染性腸道病毒進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析。
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